微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)
食品衛(wèi)生綜合檢驗(yàn)試驗(yàn)總結(jié)
食品質(zhì)量091金秀建201*016521
為期五天(201*年6月11日-15日)的食品衛(wèi)生綜合檢測(cè)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)告一段落了,在這一周的微生物實(shí)驗(yàn)主要包括牛奶中大腸菌群的計(jì)數(shù)、雞蛋中沙門氏菌的檢驗(yàn)和牛奶中金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)三個(gè)實(shí)驗(yàn),經(jīng)過三個(gè)綜合實(shí)驗(yàn)的課程,能讓我更能理解試驗(yàn)時(shí)要掌握的細(xì)節(jié),也要保持頭腦的時(shí)刻清醒。同時(shí)讓我對(duì)這三種微生物有了更進(jìn)一步的認(rèn)識(shí),同時(shí)讓我也對(duì)實(shí)驗(yàn)也更加熟悉了。
首先我們做的是大腸菌群的計(jì)數(shù),它是采用MPN(最大可能數(shù)法)的計(jì)數(shù)來測(cè)定的。大腸菌群的特性為:在37℃,24小時(shí)內(nèi)能發(fā)酵乳糖,產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,好氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌,一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。其檢測(cè)原理為細(xì)菌在樣品內(nèi)的分布是隨機(jī)的,所以檢測(cè)細(xì)菌時(shí),可按概率理論計(jì)算菌數(shù)。大腸菌群MPN計(jì)數(shù)的檢驗(yàn)程序?yàn)闃悠返南♂、初發(fā)酵試驗(yàn)、復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)和最后的大腸菌群最可能數(shù)(MPN)的報(bào)告。那么在第一天的上午,老師基本給我們講了實(shí)驗(yàn)的原理和步驟,以及一些需要注意的地方,我們便開始計(jì)算自己需要配制的實(shí)驗(yàn)試劑的量,并且稱取試劑的量和清洗所要用的實(shí)驗(yàn)器皿,首先配置的是生理鹽水和LST肉湯,并且把生理鹽水和LST肉湯分裝到試管內(nèi),蓋好蓋子包扎好進(jìn)行滅菌,滅完菌也就到了吃飯時(shí)間,等下午來接種培養(yǎng)了。
牛奶樣品與生理鹽水以1:9的比例進(jìn)行混合,搖勻后做10倍系列的稀釋,做了3個(gè)稀釋度。隨后將三個(gè)稀釋度的樣品勻液以每個(gè)稀釋度3支試管接種到內(nèi)裝小導(dǎo)管的含LST肉湯的試管中,最后放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。在經(jīng)過24h的培養(yǎng)后,所有的試管內(nèi)均產(chǎn)生氣體,而后我們要將培養(yǎng)后的有菌落的LST肉湯接種到BGLB肉湯試管中進(jìn)行培養(yǎng)24-48h,觀察后發(fā)現(xiàn)所有的BGLB管都產(chǎn)氣,顏色也有原來的綠色變成暗黃色,證明也產(chǎn)生了酸,所以記為所有產(chǎn)氣管為大腸菌群陽(yáng)性管。最后查MPN表可得出每毫升樣品中大腸菌群的MPN為大于等于1100ml/MPN。
我們小組在做大腸菌群測(cè)定還是很順利的,中途沒有出現(xiàn)什么錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)很順利,小組成員的配合和分工也都很好。
第二個(gè)實(shí)驗(yàn)是雞蛋中的沙門氏菌的檢測(cè),他的特性是:沙門氏菌需氧或兼性厭氧,10-42℃都可生長(zhǎng),最適溫度為37℃,大部分可發(fā)酵葡萄糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,是革蘭氏陰性的無芽孢桿菌。在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上生長(zhǎng)產(chǎn)生光滑,濕潤(rùn),半透明,邊緣整齊的菌落。在血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán),形成大小中等的灰白色菌落。實(shí)驗(yàn)過程可分為前增菌、選擇性增菌、選擇性平板分離、生物化學(xué)篩選四個(gè)階段。
實(shí)驗(yàn)首先配制BPW溶液,進(jìn)行分裝和高壓滅菌,在無菌條件下,移取5ml雞蛋液樣品于盛有45mlBPW的組織培養(yǎng)瓶中,混勻,放置于36℃±1℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h±2h,觀察生長(zhǎng)現(xiàn)象。接下來的增菌階段,需要配制TTB增菌液和SC增菌液,移取1ml的前增菌液接種到10mlTTB增菌液內(nèi),在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h~24h,SC增菌液過程與TTB一樣。接下來需要制備BS平板和HE平板,等平板凝固后便可以開始接種了,是采用平板分多區(qū)劃線的方法,然后放在37度溫箱培養(yǎng)18~24h。最后要進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn),要先配制三糖鐵瓊脂,從培養(yǎng)皿的平板上挑取可疑菌落,接種到三糖鐵瓊脂,先與底層穿刺,再在斜面劃線。同時(shí)把菌落接種到各種生化試劑里,封口后一起放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)18h。取出培養(yǎng)皿和生化小試管觀察結(jié)果,記錄。
第三個(gè)實(shí)驗(yàn)是金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn),它的特性一般是無芽孢,鞭毛。大多數(shù)無莢膜,革蘭氏染色陽(yáng)性,它培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上就能生長(zhǎng)良好,需氧或兼性厭氧。在血平板上培養(yǎng)會(huì)使紅細(xì)胞破裂,形成透明的溶血環(huán)。在顯微鏡下可以看到是紫色的,排列成葡萄狀的圓形的菌。
首先是樣品的處理,稱取22g7.5%氯化鈉肉湯溶解于250ml水中,在每個(gè)均質(zhì)瓶?jī)?nèi)移取45ml,同時(shí)制取Baird-Parker培養(yǎng)基,高壓滅菌后吸取牛奶樣品5ml到均質(zhì)瓶?jī)?nèi)。放入恒溫箱培養(yǎng)18-24h。然后用接種環(huán)取培養(yǎng)物分別劃線接種到Baird-Parker平板和血平板上,培養(yǎng)18-24h,Baird-Parker平板有可能需要培養(yǎng)45-48h。最后進(jìn)行血漿凝固酶試驗(yàn),挑取BP平板或血平板上可疑菌落1個(gè)或以上,分別接種到5ml左右BHI肉湯中,36±1℃培養(yǎng)18-24h。取新鮮兔血漿0.5ml,加入BHI培養(yǎng)物0.2-0.3ml,振蕩搖勻,置36±1℃溫箱培養(yǎng),半小時(shí)觀察一次,6小時(shí)觀察,直至出現(xiàn)凝固,判為陽(yáng)性結(jié)果。也有小組6h后也沒凝固的,則判為陰性。最后進(jìn)行革蘭氏染色實(shí)驗(yàn),觀察細(xì)菌的形態(tài)特征。最后記錄結(jié)果。
三個(gè)實(shí)驗(yàn)雖然不多,但是三個(gè)實(shí)驗(yàn)的跨度剛好是一個(gè)星期,所以我們實(shí)驗(yàn)剛好可以做完,實(shí)驗(yàn)從剛開始的懵懂到慢慢的熟悉,到最后的成功,少不了的是小組合作和老師的幫助。經(jīng)過三個(gè)微生物的實(shí)驗(yàn),讓我對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)的過程。不過對(duì)于微生物的實(shí)驗(yàn)一定要細(xì)心,一個(gè)是它需要的時(shí)間很長(zhǎng),要滅菌和培養(yǎng),如果做錯(cuò)都得重新再來,并且實(shí)驗(yàn)過程中不能被污染,否則會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成一定的污染或完全不可用。對(duì)實(shí)驗(yàn)流程一定要熟悉,現(xiàn)象一定要觀察仔細(xì),因?yàn)轭愃频木愑泻芏,其生產(chǎn)的習(xí)性也類似,若不觀察仔細(xì),就會(huì)有結(jié)果的偏差。我們小組的實(shí)驗(yàn)都很順利,中途雖有一點(diǎn)點(diǎn)過失,但對(duì)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)度和結(jié)果沒有什么大的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果也是讓我們蠻有成就感的,感謝小組的配合。操作不像理論,只有多次練習(xí)才有體會(huì),在今后的實(shí)驗(yàn)中,我會(huì)更加努力。
擴(kuò)展閱讀:微生物實(shí)驗(yàn)心得體會(huì)
微生物實(shí)驗(yàn)心得
姓名:關(guān)琦琦學(xué)號(hào):09070401048班級(jí):生物科學(xué)09-2班指導(dǎo)老師:吾爾恩微生物實(shí)驗(yàn)心得
本學(xué)期已臨近尾聲,我們即將告別微生物實(shí)驗(yàn)這門課程,在這一學(xué)期,八個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)中,我們學(xué)到了許多知識(shí),這些知識(shí)將會(huì)陪伴我們一生,下面我們就來通過一些實(shí)驗(yàn)來回顧一下本學(xué)期的微生物實(shí)驗(yàn)。
我選取的實(shí)驗(yàn)是《環(huán)境因素對(duì)微生物的影響》,之所以選擇這則實(shí)驗(yàn)是因?yàn)檫@則實(shí)驗(yàn)比較簡(jiǎn)單,而且涉及面非常多。首先我們來分析一下這則實(shí)驗(yàn)所涉及到的知識(shí)面。環(huán)境對(duì)微生物生長(zhǎng)影響主要分以下幾種
溫度:通過影響蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)入細(xì)胞膜的流動(dòng)性及完整性來影響微生物的生長(zhǎng)、繁殖和新陳代謝。微生物群體生長(zhǎng)、繁殖最快的溫度為其最適生長(zhǎng)溫度。
PH:H+影響菌體細(xì)胞質(zhì)膜上電荷性質(zhì),微生物吸收物質(zhì)變化,影響代謝,高濃度H+或引起菌體表而蛋白質(zhì)和核酸水解以及影響酶和活性.
滲透壓:微生物在等滲溶液中可正常生長(zhǎng)繁殖;在高滲溶液中細(xì)胞失水,生長(zhǎng)受到抑制;在低滲溶液中,細(xì)胞吸水膨脹,因?yàn)榇蠖鄶?shù)微生物具有較為堅(jiān)韌的細(xì)胞壁,細(xì)胞一般不會(huì)裂解,可以正常生長(zhǎng),但低滲溶液中溶質(zhì)含量低,在某些情況下也會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)。
抗生素:在自然界中普遍存在微生物間的拮抗作用,許多微生物可以產(chǎn)生抗生素,能選擇性的抑制或殺死其他微生物。
微生物的實(shí)驗(yàn)其實(shí)簡(jiǎn)單來說步驟幾乎相同:制作培養(yǎng)基、倒平板、接種微生物、培養(yǎng)、觀察菌種生長(zhǎng)情況從而得出結(jié)論。本次實(shí)驗(yàn)也是這樣首先制作培養(yǎng)基,在進(jìn)行倒平板步驟時(shí),對(duì)平板環(huán)境進(jìn)行區(qū)分,然后進(jìn)行接種。
在進(jìn)行倒平板的時(shí)候,要注意在無菌條件下進(jìn)行倒置,同時(shí)也要保持平板的厚度均勻。
在進(jìn)行菌種接種的時(shí)候,選擇合適的劃線方式,一般是選擇Z字形劃線法,注意不要把平板弄破,等到平板凝固后才可以進(jìn)行接種。接種時(shí)也要注意在無菌條件下接種。經(jīng)過培養(yǎng)后,再觀察最后得出結(jié)論。
通過一學(xué)期的實(shí)驗(yàn),我越發(fā)的明白實(shí)驗(yàn)操作對(duì)于結(jié)果的重要性。實(shí)的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)操作可以說是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵部分,可是馬虎不得。對(duì)于需要團(tuán)隊(duì)合作的實(shí)驗(yàn),個(gè)人認(rèn)為要有強(qiáng)勢(shì)的人員搭檔,不說是精通實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程,最少也得知道實(shí)驗(yàn)的基本操作,掌握要做實(shí)驗(yàn)的操作方法,這對(duì)于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)無疑是與決定性作用的。對(duì)于個(gè)人的實(shí)驗(yàn)?zāi)芰,關(guān)鍵還是要看平時(shí)的積累,有些實(shí)驗(yàn)操作繁瑣復(fù)雜,需要極大的耐心,這些都應(yīng)該是逐漸培養(yǎng)起來的。最后,簡(jiǎn)單談一下自己在微生物實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)的心得體會(huì)。剛開始的時(shí)候,最令我頭痛的就是培養(yǎng)基的配制、消毒滅菌,培養(yǎng)基的配制和消毒與滅菌兩個(gè)實(shí)驗(yàn)可以說是微生物實(shí)驗(yàn)的最近本課程,內(nèi)容有配制培養(yǎng)基、分裝培養(yǎng)基、為下次試驗(yàn)準(zhǔn)備菌種及無菌器材等,內(nèi)容顯得非常繁多緊湊,需要準(zhǔn)備的器材、藥品及用具較多、較雜、較細(xì)。最后只能是提前參照微生物實(shí)驗(yàn)教材,將實(shí)驗(yàn)過程中所涉及到的藥品、器材及儀器等統(tǒng)統(tǒng)羅列出來,計(jì)算出實(shí)驗(yàn)時(shí)大小材料需用的數(shù)量,這樣,一方面可以有效避免在實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)遺忘相關(guān)物品,另一方面也可為以后同一實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作提供依據(jù),使實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作逐步趨于程序化,從而在有效低實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作量的同時(shí),最大限度地提高準(zhǔn)備效率。還有一點(diǎn)很重要,在科研型實(shí)驗(yàn)室里就不能不說導(dǎo)師和師兄師姐,其實(shí)他們才是最具價(jià)值的“活文獻(xiàn)”,他們就是實(shí)驗(yàn)室里的參考文獻(xiàn),活參考書。生物就是一門實(shí)驗(yàn)的科學(xué),其中科研經(jīng)驗(yàn)的積累就是一個(gè)非常重要的組成部分,導(dǎo)師和師兄師姐的一句話往往可以事半功倍,大幅提高實(shí)驗(yàn)的成功率和效率?傊,為了保證實(shí)驗(yàn)過程高質(zhì)高量完成,除了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及實(shí)驗(yàn)過程外,還要求實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員必須具備相應(yīng)的素質(zhì),實(shí)驗(yàn)操作人員必須具備較扎實(shí)的專業(yè)基礎(chǔ)、熟練的實(shí)驗(yàn)技能及高度的責(zé)任心,在工作中要善于總結(jié),同時(shí)還要和理論課老師積極溝通,這樣才能夠真正的學(xué)好微生物實(shí)驗(yàn)這門課程。
友情提示:本文中關(guān)于《微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)》給出的范例僅供您參考拓展思維使用,微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié):該篇文章建議您自主創(chuàng)作。
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